“開啟”熒光燈可對蛋白質錯誤折疊發光

一種新的方法使用熒光來檢測由於壓力或突變而散開的潛在致病形式的蛋白質。來自賓夕法尼亞州立大學和華盛頓大學的一組研究人員重新設計了一種熒光化合物,並開發了一種方法來同時點亮兩種不同的錯誤折疊的蛋白質和完美娛樂城聚集在活細胞內,突出了可能在多種神經退行性疾​​病中起作用的形式,包括阿爾茨海默氏病和帕金森氏病。最近有兩篇描述該方法的論文在線發表在 化學生化 以及《美國化學學會雜誌》。

“為了正常運行,蛋白質會折疊成非常精確的結構,但環境註冊送點數ss或致病性突變會導致蛋白質錯誤折疊和聚集,”賓夕法尼亞大學化學及生物化學和分子生物學助理教授張欣說。 娛樂城ptt國家和研究小組的負責人。 “蛋白質聚集是一個多步驟的過程,據信中間形式是娛樂城廣告以前的成像技術無法檢測到,導致許多疾病,包括阿爾茨海默氏病,帕金森氏病,2型糖尿病和囊性纖維化。我們開發了Aggregation Tag方法-AggTag-來查看這些以前無法檢測的中間體-可溶性寡聚物-以及活細胞中的最終聚集體。”

先前用於鑑定蛋白質聚集的技術使用的熒光化合物總是被點亮,這使得無法正確地將折疊的蛋白質與中間形式區分開,因如何算出你的偏財運為兩者都會觸發低水平的彌散熒光。 AggTag方法使用“開啟熒光”,因此該化合物僅在錯誤折疊開始發生時才會點亮。

“當熒光化合物有足夠的移動六合彩規則空間時,它會自由旋轉,任你博娛樂城賓夕法尼亞州立大學化學助理研究員,AggTag方法的主要開發者劉柳說:“在存在適當折疊的蛋白質的情況下,d仍保持關閉狀態。但是當蛋白質開始錯誤折疊和聚集時,化合物的運動變得受限,並且開始點亮。熒光漫射表明存在中間低聚物,而熒光亮的小點表明存在緻密的不溶性聚集體。”

為了區分這兩種形式,研究小組重六合彩金額算法新設計了綠色熒光蛋白(GFP)的致色核心,該材料通常在成像研究中使用,因為當暴露於某些波長的光時,它會發出熒光。重新設計的化合物與標籤結合,標籤又與目標成像的蛋白質融合。

該研究小組使用了兩種不同類型的市售標籤,即Halo標籤和SNAP標籤,當與AggTag一起使用時,它們分別可以誘導紅色或綠色熒光。由於Halo標籤和SNAP標籤不會相互影響,因此可以使用它們同時對兩種顏色的兩種不同蛋白質成像。該團隊還設計了標籤,以便可以顛倒綠色和紅色,為研究人員提供了未來成像的選擇。

張說:“我們計劃繼續開發這種方法,以便可以通過顏色變化發出信號,指示寡聚體轉變為不溶性聚集體。” “這種方法提供了一個新的工具箱來研究蛋白質聚集,這是目前科學家們高度研究的話題。希望這將使我們能夠更好地了解蛋白質聚集的整個過程,以及每種形式在神經變性和神經退行性進展中的作用。其他疾病。”

本文已從Penn State提供的材料中重新發布。注意:材料的長度和內容可能已被編輯。有關更多信息,請聯繫引用的來源。

參考:關浩貞,張宗j,劉瑜,張欣。 2019.基於Halo和SNAP標籤的熒光AggTag方法,可同時檢測活細胞中兩種蛋白質的聚集。 https://doi.org/10.1002/cbic.201800782。