克服CRISPRiwin娛樂城的挑戰

CRISPR是一項通過高精度基因組編輯徹底改變生物醫學研究的技術。然而,即使它允許相對容易地產生或糾正由單個或幾個核苷酸組成的突變,但在將更大的DNA片段引入基因組中仍然具有局限性。例如,產生熒光蛋白的基因如廣泛使用的GFP妞妞一直輸的基因組插入效率低下並且涉及復雜的可樂寧。帝禾娛樂城g步。

Bellvitge生物醫學研究所(IDIBELL)的Cerón博士小組使用模型生物秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditis elegans)來優化該技術,從而開發了稱為Nested CRISPR的方法。這種無克隆方法涉及兩個步驟插入長DNA片段。第一步,將一小部分(少於200個核苷酸)的長片段插入基因組中。然後,在第二步中,此小片段用作“嵌套”或“著陸墊”,以有效插入較長的片段(大約一千個鹼基)。

最近發表於 遺傳學是美國遺傳學學會(遺傳學 Society oF America)的期刊,引起了前所未有的興趣,並且在該期刊的關注度方面獲得了最高的評價。生命週期短的模型生物(例如秀麗隱桿線蟲)使研究人員能夠探索CRISPR的可能性和局限性。這項工作是傑里米·維辛西奧(Jeremy Vicencio)博士論文的一部分,該論文由La Caixa授予享有聲望的INPhINIT獎學金。傑里米(Jeremy)與博士前研究人員卡門·馬丁內斯(CarmenMartínez)和塞尼亞·塞拉特(XèniaSerrat)一起在秀麗隱桿線蟲種系中進行了數百次顯微注射,並進行了數千次基因分型,以堅實而線上 捕 魚 機令人信服地證明了這項新技術Nested CRISPR的效率。

Nested CRISPR第一步使用商業寡核苷酸,第二步使用通用PCR產物。通過使用熒光蛋白標記數百個基因,可以促進大規模實驗。此外,由於Nested CRISPR是模塊化的,因此其他感興趣的肽或蛋白質也可以與這些熒光蛋白質結合在一起。例如,該小組目前正在研究用允許以受控方式降解它們的肽標記這些熒光蛋白。

最後,由IDBELL的Cerón博士指導的秀麗隱桿線蟲的模型疾病打算使用Nested CRISPR替換人類秀麗線蟲中的基因。這將促使使用這種小的線蟲作為多細胞模型來研電競下注究ohoya娛樂城F 911娛樂城關聯的人類突變發發網充滿疾病。該系統將在個性化醫學領域引起極大興趣,因為它可以快速有效地提供有關突變或基因組變異(稱為多態性)的致病性的預後。

該文章已由Bellvitge生物醫學研究所提供的材料重新發表。注意:材料的長度和內容可能已被編輯。有關更多信息,請聯繫引用的來源。

參考:Jeremy Vicencio,卡門·馬丁內斯·費爾納(CarmenMartínez-Ferná)94大發網ndez,XèniaSerrat和JuliánCerón。 2019.通過線蟲巢式CRISPR高效生成內源熒光報告基因。