Cas9是DNA擴增領域的新孩子註冊送點數

是否通過DNA證據揭示肇事者,診斷病原體,對古生物學發現進行分類或確定帕特線上娛樂城顯而易見,核酸的重複(擴增)是必不可少的。在日記中 Angewandte Chemie,科捕 魚 達人 機 台學家現在已經推出了一種新的,非常簡單增加偏財運的方法的,但高度靈敏和可靠的方法,該方法避免了常規的加熱和冷卻步驟以及復雜的儀器。試劑可以冷凍乾燥,使這種通用方法可以在實驗室外使用娛樂城註冊送y。

最常用的擴增方法是聚合酶鏈反應(PCR),該方法基於在對功率有很高要求的特殊儀器中重複多個熱循環。例如,很難在實驗室外,患者床旁或偏遠的地方進行操作。沒有熱的替代方法娛樂城appl循環通常很複雜或不夠靈敏,需要昂貴的試劑,或者不能廣泛應用。

中國上海華東理工大學的殷斌成和葉邦策的研究人員現在已經開發出一種廉價的新方法:基於Cas9n的擴增反應(Cas9nAR),它只需一步即可在均勻溶液中溶解,並在37°C的恆溫下進行。

在這種方法中,研究人員使用了細菌“免疫系統”中的成分。例如,當細菌被病毒感染時,它們會將外來遺傳物質切成小塊,並將它們引入自己基因組的特定區域。在隨後的感染中,細菌的RNA鏈“識別”這些序列,並引導特殊的“遺傳剪刀”切割外源DNA。這些工具也已用於現代基因工程中。

尹,葉和他們的同事改變了名為Cas9的基因剪刀,以使其不再完全切割DNA。取而代之的是,它僅切入一根線,引入了“缺口”。這種酶稱為“切口酶”。像在細菌系統中一樣,Cas9切口酶與RNA鏈結合,從而確定切口的位置。例如,可以製造這種RNA以使其識別病原體的DNA序列。然後,Cas9切口酶切口緊鄰的DNA。

對於這項新技術,研究人員產生了兩財神娛樂城種不同的Cas9切口酶RNA複合物,它們在兩個不同的地方切口了DNA。 PCR中常用的聚合酶(exo_ Klenow聚合酶)從第一個切口開始對切割的鏈進行補充,將舊鏈逐段釋放,直到到達第二個切口。新完成的DNA反復被切刻,並被切刻酶複合物補充。該過程釋放的短單鏈成為第二個循環中進一步擴增的起點。除了切口酶複合物和聚合酶外,唯一需要的是兩個合適的引物作為複制起點。

用細菌基因組DNA片段進行的測試表明,目標序列被精確識別並擴增。在20μl的體積中,有可能檢測到一個分子。單個核苷酸的差異大老爺娛樂城可以高度特異性地檢測基因中的de。

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參考:王婷,劉勇博士,孫歡歡,畢博士娛樂城推薦尹正誠和葉邦慈教授2019.基於RNA指導的Cas9鎳酶的通用等溫DNA擴增方法,Angewandte Chemie。 https://doi.org/10.1002/anie.201901292。